【摘 要】
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目的 观察Claulansine F对NSC分化的影响及其机制的研究.方法 分离孕期14 d SD大鼠胚胎脑隔区消化分散为单细胞在体外悬浮培养.扩增至第三代对其进行分化和增殖能力评价.
【机 构】
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中国医学科学院药物研究所,北京100050
【出 处】
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第十六届全国神经精神药理学学术会议
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目的 观察Claulansine F对NSC分化的影响及其机制的研究.方法 分离孕期14 d SD大鼠胚胎脑隔区消化分散为单细胞在体外悬浮培养.扩增至第三代对其进行分化和增殖能力评价.分别以nestin,TUJ-1,MAP-2作为神经干细胞,新生神经元,成熟神经元的标志物进行免疫荧光观察.通过Western blot和反转录PCR法观察四条涉及干细胞分化和增殖信号通路的激活情况.结果 体外NSC具有高度增殖活力,并在特定分化条件刺激下,能够向神经元和星形胶质细胞分化,证明了其可以作为本实验的细胞模型.Claulansine F能够在96 h内显著促进NSC的TUJ-1的表达,同时降低nestin的阳性表达率,提示其可能具有促进NSC向神经元分化的能力.而持续刺激7d后与空白对照相比出现更多MAP-2,TUJ-1阳性细胞,提示其可能具有促进NSC成熟的作用.β连环蛋白降解酶GSK3β的降解活性受到抑制,AKT与ERK呈现激活状态,说明了Wnt通路的激活,提示其可能参与到Claulansine F的促分化作用.Claulansine F能够显著抑制NSC的增殖活力与多能标志物的表达,且细胞中Notch通路的下游Math1和Dll1的转录水平显著增加,而Hes5则呈现显著地下降.说明该通路处于未激活状态,而作为该通路受体复合物组件之一的Notch1的转录水平并无变化.结论 Claulansine F可能是通过影响NICD复合物的形成进而阻止其核转位来阻断Notch信号传导,从而细胞增殖,促进NSC的分化.
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