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2,3-吲哚醌(2,3-indolinedionc,MW147,isatin,以下简称ISA)又名靛红,是一种新型天然海洋药物,也存在于中药青黛、板蓝根中。已发现其对肿瘤细胞的生长有抑制作用,但具体作用机制尚不明。本研究以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为靶细胞,观察ISA对SH-SY5Y细胞的作用及其机制。将体外培养的SH-SY5Y细胞分为对照组和ISA不同浓度(0、100、200、400μmol·L-1)处理组,采用荧光染色、DNA ladder分析细胞凋亡,RT-PCR及Western blotting等方法检测不同浓度ISA作用后基因vegf,survivin,bcl-2,bax及p53在mRNA和蛋白水平的变化,Caspase-3在蛋白水平的变化。结果显示:ISA(0、100、200、400μmol/L)作用SH-SY5Y细胞48 h后,在荧光显微镜下观察到400μmol/L ISA组细胞出现典型的凋亡形态学改变:核染色质聚集、核碎裂、胞质浓缩;琼脂糖凝胶电泳显示200、400μmol·L-1 ISA处理组细胞出现明显的梯子样条带;RT-PCR及Western blotting显示:随着ISA药物浓度的增加bcl-2 mRNA及蛋白表达、survivinm RNA及蛋白表达逐渐减少(P<0.05);bax mRNA及蛋白表达水平未见变化(P>0.05);与未加药对照组(0μmol/L)比较,各浓度加药组的VEGFmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05);随着ISA药物浓度的增加野生型p53mRNA表达水平逐渐增加(P<0.05),同时突变型P53蛋白表达水平逐渐减少;caspase-3蛋白表达随着药物浓度的升高逐渐增加且差异有显著意义(P<0.05)。本实验显示ISA可能作用多个靶点:1)通过降低VEGF的表达直接切断肿瘤的营养来源;2)上调野生型P53表达水平,促进细胞核凋亡诱导途径;3)下调bcl-2表达水平,降低bcl-2/bax,活化caspase-3,诱导凋亡,4)下调survivin表达水平,解除其对caspase-3的抑制促进细胞凋亡。