实时荧光PCR检测旋毛虫方法的建立与初步应用

来源 :中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq793053
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根据本实验室前期扩增的各旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计了一对特异性引物及TaqMan MGB探针。以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了实时荧光PCR检测旋毛虫的方法。该方法只能在各旋毛虫隔离种DNA样本中检测到荧光信号,对小鼠、狗和猪正常肌肉组织、猪鞭虫、猪蛔虫、猪钩虫、犬蛔虫等DNA检测,不出现非特异性荧光信号;最小检出量为1.32×102拷贝数和10—5条旋毛虫,建立的标准曲线拟合良好,扩增方程Y=-3.43X+19.70,相关系数R2=0.9984,扩增效率为95%;对平行复管检测,组内变异系数为1.11%(n=20),同一组不同浓度梯度样本(n=9)间隔30d重复检测,结果无显著性差异;对人工感染不同剂量猪旋毛虫的小鼠肌肉可在攻虫14d后100%检出,对送检狗肉样品可从压片镜检、人工胃液消化、胶体金试纸条检测结果为阴性的63个狗肉样本中敏感地检出8个阳性。
其他文献
随着转基因技术的发展,GFP报告基因已成为转基因动物上常用的的报告基因之一。目前对于转基因动物传代前后基因表达的变化,仅见个别基因的研究,常规育种所用的模型(数学方程式来
影响畜产品安全的因素很多,主要有动物饲料、动物疫病、兽药、激素残留、有毒有害的化学物质污染、动物饮水,以及饲养、饲养的周围环境等。最熏要的因素首先是动物疫病,许多动物
目的:为了满足政府监管猪肉的安全生产和食品消费者的知情权,保障猪肉食品的公共安全, 方法:本研究采用动物的标识技术、PDA智能识读技术、GPRS技术、Intranet和Internet等技
土壤水分是影响作物生长的重要环境因子,温室土壤水分蒸发量不仅是灌溉管理的主要依据,同时它对温室的温度、湿度和环境调控亦有重要影响,并将影响到作物的产量、品质及生产的经
自动导航是实现农业机器人自动作业的核心和关键问题,也是制约农业机器人发展的瓶颈。 在长期的农业机器人自动导航系统研究中,人们经历了基于路标、气味、机器视觉及星基
通过对陕西杨凌地区兔场球虫感染情况调查,发现该地区种兔球虫阳性率为100%(300/300),且均为混合感染,感染强度OPG最大值为1963。共检出9种艾美耳属的球虫,分别是中型艾美耳球虫(E
为进一步探讨“禽球灵”对鸡球虫病的防治效果,本试验采用人工感染发病的方法,研究了“禽球灵”对雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后不同时间的红白细胞总数、血红蛋白含量以及红细胞压
为摸清黑龙江省部分地区牛弓形虫的感染情况,应用弓形虫循环抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)对采自兰西县、富裕县、讷河市的34份牛血清进行了弓形虫血清学检测,结果表明:在被检的34
11只10日龄小鹅分别接种0.5x106~2.1×106个赫氏艾美球虫孢子化卵囊,在接种后48~192 h期间内分期剖杀,对赫氏艾美球虫的生活史和致病性进行了动态性观察。在内生性发育过程中,赫氏
生猪生产既是农业的重要组成部分,也是社会稳定、人民生活水平不断提高的重要物质基础。本文介绍了国家生猪良种补贴项目的由来,浅谈了国家生猪良种补贴项目现状,阐述了猪人工授