军曹鱼MHC-Ⅱ β基因全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建

来源 :2009年中国水产学会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bobshen88888
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  采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法,得到1161bp的军曹鱼MHCⅡβ全长cDNA片段.该序列包括20bp的5末端非编码区(5UTR),394bp的3末端非编码区(3UTR)及747bp的开放阅读框(ORF),编码248个氮基酸,预测其蛋白质分子量约为27.99ku,等电点为6.21.通过构建MHCⅡβ氨基酸序列的系统进化树,并进行比对,结果表明,军曹鱼和已知鱼类,老鼠,鸡及人类MHCⅡβ基因的同源性在28.5% ~ 76.7%之间.所推测的蛋白序列具有一些重要的特征,包括:前导肽,β1,β2和CP/TM/CYT区,保守的半胱氨酸等.同时构建了pRSET A-RCMHCⅡβ的原核表达载体,为进一步研究MHCⅡβ基因的重组表达和免疫学功能奠定了基础.
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