【摘 要】
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目的：研究小干扰RNA(si RNA)阻断巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因表达对糖皮质激素抑制脂质炎症介质释放的影响及其细胞内机制.方
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院烧伤科,200433上海
【出 处】
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第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会
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目的：研究小干扰RNA(si RNA)阻断巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)基因表达对糖皮质激素抑制脂质炎症介质释放的影响及其细胞内机制.方法：体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,采用免疫荧光法观测siRNA转染效率,PCR检测MIF mRNA的表达,Western blot检测MIF蛋白的表达；RAW细胞转染MIF siRNA后观察糖皮质激素(Dex)抗炎作用的变化,用ELISA检测细胞上清中前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4 (LTB4)的含量,Western blot检测胞浆膜联蛋白Annexin 1和下游胞浆内的磷酸酯酶A2 α(cPLA2α)的蛋白表达变化.结果：与阴性对照相比,MIF siRNA能有效阻断细胞内源性MIF蛋白的表达,增强RAW细胞对Dex作用的敏感性；抑制细胞内源性MIF的表达,能明显增强Dex抑制PGE2和LTB.产生的效应,增加胞浆蛋白Annexin 1的表达,抑制cPLA2 α的磷酸化.结论：MIF siRNA能增强糖皮质激素抑制脂质炎症介质PGE2和LTB4的释放,且可能是通过影响Annexin 1-cPLA2 α信号通路实现的.阻断内源性MIF的表达可显著增强RAW细胞对糖皮质激素抗炎作用的敏感性.
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