【摘 要】
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目的：探索快速、简便、经济,适用于革兰阴/阳性菌基因组DNA制备的方法.方法：采用8种不同的简化的细菌DNA制备方法制备大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌DNA,观察不同方法所得DNA的含量、完整性、A260/A280比值、A260/A230比值以及用其作为模板进行实时荧光定量PCR扩增反应的效果.结果：各方法制备大肠埃希菌DNA的效果较好,制备金黄色葡萄球菌DNA的效果不如大肠埃希菌.含有SDS的裂解液
【出 处】
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四川省医学会第十六次检验医学学术会议
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目的：探索快速、简便、经济,适用于革兰阴/阳性菌基因组DNA制备的方法.
方法：采用8种不同的简化的细菌DNA制备方法制备大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌DNA,观察不同方法所得DNA的含量、完整性、A260/A280比值、A260/A230比值以及用其作为模板进行实时荧光定量PCR扩增反应的效果.
结果：各方法制备大肠埃希菌DNA的效果较好,制备金黄色葡萄球菌DNA的效果不如大肠埃希菌.含有SDS的裂解液裂解细菌和去除蛋白的效果较其它方法好.各方法煮沸5分钟与煮沸10分钟所得DNA含量和实时荧光定量PCR检测细菌DNA的Ct值均无统计学差异,但煮沸10分钟的DNA液中多糖等杂质增多.
结论：碱-SDS煮沸法煮沸5分钟制备细菌基因组DNA的效果最优,单纯的水煮沸法效果最差.
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