广东地区2019年健康儿童血清中腺病毒3型和7型的中和抗体水平

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背景人腺病毒(HAdV)导致是儿童社区获得性肺炎的主要病原之一,容易并发呼吸衰竭,急性呼吸窘迫综合征(ARDS),中毒性脑病或脑炎,脓毒症等,重症病例易遗留慢性气道和肺疾病,致残甚至死亡。HAdV属腺病毒科,哺乳动物腺病毒属的无包膜双链DNA病毒,核酸和核心蛋白被二十面体的衣壳包被,衣壳由六邻体,五邻体基底和纤维蛋白突起组成。六邻体7个高变区上的表位是诊断不同血清型的标准,它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分,是病毒体对免疫选择压力最敏感的部位。每个五邻体基底上结合着1根纤维突起,纤突有血清特异性,且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决定位点。HAdV有A-G7个种,70种血清型,200多个基因型,不同的血清型产生不同的致病性和不同的器官亲和性[1,2]。B,C,E亚种是引起婴幼儿社区获得性肺炎的主要型别,其中HAdV3和HAdV7同属于腺病毒B亚种,是儿童腺病毒肺炎中最常见的血清型,在亚洲,欧洲,美洲引起流行和爆发[3-6]。一些研究表明,腺病毒肺炎的严重程度与血清型之间可能的联系[7-9]。总的来说,HAdV3和HAdV7肺炎发病年龄低(中位年龄分别为1.8和1.1岁),发热时间长,小儿危重症比例高,肺外受累突出表现在神经系统、血液系统和酶学、等改变。HAdV7肺炎患儿在临床表现、血细胞数目指标、生化指标、促炎性细胞因子指标、影像学资料均较HAdV3更加凶险[10-11]。病毒通过呼吸道传播,容易在社区引起流行,感染后潜伏期短,起病急,高热超过39度,有明显的呼吸道症状和全身中毒症状,容易引发重症肺炎,并发呼吸衰竭,ARDS,3%-10.8%中毒性脑病、脑炎[12-14]。目前尚无针对腺病毒的有效抗病毒治疗和疫苗,因此对健康儿童群体进行这两种腺病毒中和抗体检测,分析儿童血清病毒抗体水平,对于了解群体免疫,评估适应性免疫情况,预测潜在爆发均有重要意义。方法首先,我们建立了HAdV3和HAdV7的中和抗体检测方法,然后检测了事先收集的350份从2019年8月-2019年12月来源于广州市妇女儿童医疗中心门诊预防保健科,同时排除呼吸道症状的健康体检儿童血清。样本按年龄分成7个组(A组0-6m,B组6-12m,C组12-24m,D组24-36m,E组36-48m,F组48-60m,G组>60m),每组50份血清。结果 HAdV3NAb或HAdV7NAb阳性率均先降后升,新生儿(0-6m)HAd V7NAb阳性率30.00%,AdV3NAb阳性率40.00%;随着年龄的增长,中和抗体阳性率下降,到幼儿(1-2y)降至最低(6.00%),此后随年龄增长阳性率增加,HAdV3Nab增加的幅度比HAdV7NAb大,到学龄前期(>5y)HAdV7NAb阳性率24.00%,HAdV3NAb阳性率64.00%。各年龄组中,HAdV3NAb或HAdV7NAb两种抗体都不存在的血清分布以C组和D组例数最多,G组A组最少。相反地,只携带1种中和抗体的血清A组、G组最多,C组、D组最少,其中只携带HAd7Nab占20.45%,并且在C-G组HAd7NAb阳性率仅有5.68%。同时携带两种中和抗体的血清以G组最多,C组最少。根据血清中和能力,将中和实验分成阴性,阳性(1:8,1:32,1:128,和1:256)五种结果,1:8和1:32为低效价,1:128和1:256为高效价。单独HAdV3Nab+,HAdV3Nab+和HAdV7Nab+以C组最少。单独HAdV7Nab+样本数最少(5.14%),并且以1:8低效价及A年龄组为主要,其余各年龄组也几乎不存在中、高滴度HAdV7Nab。在双阳性样本中,总体HAdV3阳性血清效价比Ad7阳性血清效价高,低效价HAd V3NAb与HAdV7NAb主要分布在A组。高效价HAdV3Nab,低效价HAdV7NAb主要分布在C-G组,高效价HAdV3NAb与HAdV7NAb分布在E-G组,低效价HAdV3Nab,高效价HAdV7NAb在E组以后出现。结论 1-2岁阶段是感染HAdV的高风险期,选择这个时期接种疫苗是最佳的。HAdV7比HAdV3潜在更高的爆发流行风险,HAdV3NAb和HAdV7NAb之间没有交叉保护作用。
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