【摘 要】
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将本实验室构建的小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6 μg基因枪轰击和100μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,小鹅瘟弱毒疫苗按每只100μL免疫BALB/c小鼠,以peDNA3.1(+)和生理盐水为对照。并于免疫后3、7、14、21、28、35、49、63、77、105 d采抗凝血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和
【机 构】
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四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安 625014 四川农业大学动物医学学院禽病防治
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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将本实验室构建的小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6 μg基因枪轰击和100μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,小鹅瘟弱毒疫苗按每只100μL免疫BALB/c小鼠,以peDNA3.1(+)和生理盐水为对照。并于免疫后3、7、14、21、28、35、49、63、77、105 d采抗凝血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和CD4+,CD8+T淋巴细胞动态变化,以上10个时间段再加免疫后133、161、189、217d采凝血用酶联免疫实验(间接ELISA法)检测小鼠特异性IgG抗体。结果表明:基因枪轰击6 μg组、肌肉注射100μg组和弱毒疫苗组都能诱导小鼠产生细胞免疫和体液免疫应答；且基因疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫和体液免疫应答比弱毒组强。
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根据GenBank中发表的斑点又尾鲴干扰素基因序列设计一对引物,采用RT-PCR在斑点叉尾鮰淋巴细胞中克隆出了α-干扰素基因。序列分析显示与已发表的序列同源性在96.5％以上。同时将基因连接到原核表达载体pET-32a(+)上,构建重组表达质粒,转入BL21经0.2mmol/L的IPTG诱导4小时后经SDS-PAGE分析,可见一约19KD的清晰蛋白带,用Bandscan软件分析蛋白表达量为48.4
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