本文建立了在线自动化柱前衍生-高效液相色谱法测定食品中组胺的新型测定方法。通过对测定过程中各个影响因素进行优化，如自动化衍生程序的设定，衍生试剂的用量，衍生体系pH值影响等，确立了适宜的测定条件。在该条件下，对于组胺标准的测定低限为0.01μg/mL，在0.05-100μg/mL范围内，线性关系良好(r2>0.999)。通过对样品基质进行加标，最终确立的最低检出限为0.20mg/kg。将所建立的方法应用于金枪鱼罐头，烟熏鲣鱼，冻鲭鱼等样品中组胺的测定，测得的组胺含量为0.59-167mg/kg，加标回收率均大于97％，测定值的相对标准偏差均小于5％。本文所建立的方法采用自动化柱前衍生程序和荧光法检测，具有重现性好，灵敏度高，分析通量大等特点，适用于大量样晶的常规分析测定。