TβRⅡ对口腔癌相关成纤维细胞糖代谢的调控作用研究

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目的:糖代谢为肿瘤细胞快速生长提供了主要的物质和能量来源。本课题拟研究转化生长因子受体II(TβRⅡ)对口腔癌相关成纤维细胞(carcinomaassociated fibroblasts, CAFs)糖代谢是否具有调控作用。方法:(1)采用IHC、WB、RT-PCR等检测TβRⅡ、PKM2、HIF-1α在85例OSCC、21例正常黏膜组织及15对原代口腔CAFs和NFs细胞中的表达情况,并分析三个蛋白表达的相关性;(2)用慢病毒转染CAFs原代细胞6株,上调TβRⅡ表达。用MTT、透射电镜、乳酸酶法、蛋白组学技术等,研究CAFs转染后其生物学特性、糖酵解相关因子、功能、糖代谢酶谱的变化;(3)将转染后的CAFs接种至裸鼠,4周后检测肿瘤的体积、重量及TβRⅡ和糖酵解相关因子变化。结果:(1) CAFs表达TβRⅡ下调,PKM2、HIF-1α表达升高。TβRⅡ与二者的蛋白和mRNA表达均具有中或强度的相关性;(2)在CAFs转染后,线粒体自噬现象明显减少,PKM2、HIF-1α表达下降,摄取葡萄糖和产生乳酸的能力下降。蛋白组学筛查发现TPIS、PKM2、等异常;(3)转染组的肿瘤体积和重量较未转染组有所减小、且低表达PKM2、HIF-1α。结论:通过体内、外实验初步证明了TβRⅡ对口腔CAFs的糖酵解具有调控作用。
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