紫草素诱导程序性坏死杀死软骨肉瘤并通过下调抗凋亡蛋白表达增敏阿霉素

来源 :第十五届全国骨肿瘤学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanglq2009
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  背景 软骨肉瘤是仅次于骨肉瘤的原发恶性骨肿瘤,发病年龄广。软骨肉瘤是一种对大多数化疗药物不敏感的肿瘤,抗凋亡蛋白的异常高表达是导致对药物耐受的重要原因。方法 MTT方法检测不同浓度紫草素、阿霉素、顺铂对软骨肉瘤细胞SW1353、CS-1及常见骨肉瘤细胞U2OS、SaoS2、HOS、143B、D-LM8的作用;MTT方法检测程序性坏死特异性抑制剂Nec-1及泛Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对紫草素诱导的软骨肉瘤细胞SW1353、CS-1死亡的挽救作用;流式技术检测紫草素对软骨肉瘤细胞周期的影响,并用流式技术及hoechst/PI双染检测紫草素作用后软骨肉瘤细胞凋亡-坏死比率;Westem blot技术检测紫草素作用后软骨肉瘤细胞SW1353、CS-1中程序性坏死相关蛋白RIP1、RIP3、凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-6、PARP和抗凋亡蛋白BCL-2、BCL-XL的变化,并检测软骨肉瘤细胞系SW1353、CS-1和常见骨肉瘤细胞系U2OS、SaoS2中BCL-2、BCL-XL表达差异;免疫共沉淀技术检测紫草素作用后软骨肉瘤细胞SW1353、CS-1中RIP1、RIP3蛋白的相互作用;用SW1353胫骨原位肿瘤模型研究紫草素对软骨肉瘤的体内作用,并用HE染色检测肿瘤坏死程度;MTT方法检测不同浓度紫草素及阿霉素单独或联合作用对软骨肉瘤细胞SW1353、CS-1的体外作用。
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