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目的 构建降钙素原(PCT)的原核表达载体,表达后将获得的重组蛋白制备成标准品抗原。方法 设计合成PCT 编码基因引物,通过聚合酶链反应(PCR)获得其全基因片段,克隆入表达载体质粒pET28a(+)中,进行菌液PCR 和DNA 双酶切鉴定。将重组质粒转化大肠杆菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用镍-氮三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化获取蛋白,用ELISA 的方法鉴定。通过热稳定性,冻干品稳定性,液态稳定性和冷藏稳定实验性对抗原进行标准品抗原验证。结果 成功获取了纯度高、稳定性较好的降钙素原(PCT)抗原。