【摘 要】
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本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(O.5mM)诱导后，取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为
【机 构】
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广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 广东广州 510623 华南农业大学动物科学学院 广东广州 51062
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本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(O.5mM)诱导后，取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为88kD，表达量占菌体蛋白30[％]，且绝大部分为可溶。转膜后用化学发光底物显色，在约88KDa位置出现目的条带，说明抗原性较好。表明己成功地表达出该可溶蛋白。
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本文利用环介导等温扩增技术(LAMP )，建立了检测猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法。该方法针对CSFV 5端保守基因成功设计了6条特异引物，经条件优化后，在63℃恒温条件下只需45min，就能很好的扩增CSFV目的片段。将CSFV和其它六株与猪瘟病毒相关的病毒进行RT-LAMP扩增，验证了该方法的特异性；RT-LAMP产物经XhoI酶酶切来确定产物的即为目的片段；RT-LAMP对CSFV的最低
对新疆南疆4个行政区6个品种的434份羊血清，采用双抗原夹心酶联免疫法检测抗戊型肝炎病毒IgG抗体，比较不同地区、不同品种及不同年龄段羊戊型肝炎抗体阳性率的差异。结果显示，所检测血清总的抗体阳性率为32.25％(140/434)，四个地区羊抗体阳性率依次为：32.34％(65/201)，37.25％(19/51)，47.25％(43/91)，14.29％(13/91)，差异极显著(P<0.01);
本研究旨在建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的间接BLISA方法，并将其用于分析浙江省生猪主产区猪群中的HEV感染状况.以表达纯化的HEV ORF2蛋白为包被抗原建立了猪血清中HEV特异性抗体的ELISA检测方法，与商品化HEV抗体诊断试剂盒的检测符合率达91.5％.对2005—2008年采集自浙江省不同地区46个猪场的1330份血清进行了检测，有741份血清检测为猪腿V抗体阳性，平均阳性率为5
戊型肝炎((Hepatitis E)是由戊型肝炎病毒((Hepatitis E virus，HEV)引起的一种急性病毒性肝炎。HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒，其基因组全长约为7.5kb，含有3个互相重叠的开放阅读框，即ORF1、ORF2和ORF3。HEV主要经粪、口途径传播，常引起戊型肝炎暴发或散发。本试验通过设计猪HEV ORF2部分基因的特异引物对ELISA阳性的屠宰猪的胆汁样品进行巢
禽霍乱是由多杀性巴氏杆菌引起的一种侵害家禽和野禽的接触性传染病，给养禽业造成了巨大的经济损失。本文对疑似禽霍乱病例进行细菌分离，通过染色镜检、菌落形态、生化特性等试验鉴定为多杀性巴氏杆菌；同时，与国内标准强毒菌株C48-1、本所上世纪70年代分离鉴定的天然弱毒菌株1010在生化反应、药敏试验及致病性实验等方面进行了比较研究。
猪戊型肝炎病毒是一种新发现的人兽共患传染病，基于对HEV基因组的研究结果，迄今为止，针对不同的基因型，己建立了多种相应的以检测抗HEV抗体及HEV RNA的诊断技术，本研究是基于TaqMan探针技术的敏感、特异、具高度重复性而建立的实时荧光定量PCR方法以此来检测猪戊型肝炎病毒。
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