【摘 要】
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目的：为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR检测方法.
方法：根据小肠结肠
【机 构】
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中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所,北京100050
【出 处】
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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
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目的：为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR检测方法.
方法：根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox基因、假结核耶尔森氏菌inv基因、志贺氏菌ipaH基因及空肠弯曲菌gyrA基因设计并筛选出特异性引物;优化退火温度等条件,分析多重PCR的特异性、敏感性,使用该多重PCR方法检测小鼠和豚鼠样品.
结果：多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即小肠结肠炎耶尔森氏菌(511bp)、假结核耶尔森氏菌(779bp)、志贺氏菌(290bp)和空肠弯曲菌(156bp).该方法的灵敏度为1×10-3ng/μL(小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌)和1×10-2ng/μL(空肠弯曲菌).特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带.使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数.
结论：该多重PCR方法在实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景.
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