【摘 要】
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Pol作为HBV DNA聚合酶具有多功能的性质.它可与宿主细胞内多种蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制.本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在
【机 构】
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暨南大学生命科学技术学院,广州5 10632
【出 处】
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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会
论文部分内容阅读
Pol作为HBV DNA聚合酶具有多功能的性质.它可与宿主细胞内多种蛋白相互作用,影响病毒和细胞的生物学机制.本文利用LTQ质谱方法寻找与Pol相互作用的宿主蛋白,筛选到与Pol潜在相互作用的45个蛋白,并通过CO-IP技术结合最终确定hnRNPK、SQSTM1、hnRNPL、EEF1A2四个蛋白与Pol有相互作用.由于POL具有影响细胞凋亡,细胞增殖,细胞癌基因表达的影响,本文研究主要集中于hnRNPK与Pol的相互作用及对上述功能影响的研究.Pol对hnRNPK的磷酸化水平和表达量没有影响.利用超表达和siRNA沉默技术,以Hoechst33258染色和检测caspase3和caspase7活化,发现Pol在Trail诱导的非线粒体依赖的凋亡途径中起抗凋亡作用是依赖于hnRNPK蛋白;免疫荧光技术检测发现hnRNPK能够影响Pol在细胞内的定位,hnRNPK能够使Pol迁移至细胞核中,并且这个迁移作用,随着Pol表达时间的增长而增强;DOX抑制增殖时,hnRNPK通过AKT,ERK途径促进细胞增殖,但是Pol的促增殖作用,并不是受AKT,ERK磷酸化调控.认为Pol在Trail诱导下的抗凋亡作用依赖于mRNPK这一途径,对这一通路的阻断,有可能为治疗乙肝病毒的药物研发提供新的思路。
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