四川山地乌骨鸡IL-1β真核表达质粒构建及对IBV DNA疫苗免疫佐剂效应研究

来源 :四川省畜牧兽医学会2007年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jerry1121
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根据Genebank上鸡IL-1β序列(Y15006)设计引物对,采用RT-PCR法从四川山地乌骨鸡的外周血淋巴细胞RNA中克隆ChIL-1β基因,将其克隆到PMD18-T载体测定序列,双酶切后,插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达质粒研制出分子佐剂pDNAIL-1β。通过间接ELISA测定其特异性抗体和流式细胞技术检测CD4+、CD8+T淋巴细胞发现,联合佐剂组与单独IBV DNA组比较在14-21天期间,出现差异极显著(P<0.01)。攻毒实验发现IBV DNA联合pDNAIL-1β组其保护率(95%)显著高于单独DNA疫苗组(85%),与弱毒苗保护率相当(95%),但低于灭活苗保护率(100%)。结果表明:IBV DNA组主要免疫后期发挥作用,pDNAIL-1β免疫早期发挥重要作用,二者联合使实验鸡体在整个免疫期较长时间内发挥较高免疫水平,pDNAIL-1β可显著增强DNA疫苗免疫作用。
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