【摘 要】
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目的本研究目的在于制备出高特异性的抗HPV16L1 IgY抗体,为HVPL1蛋白的检测提供一种方法,同时探讨IgY抗体在免疫组织化学中的应用。方法用纯化HPV1611蛋白免疫母鸡,分别收集
【机 构】
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西安交通大学医学院第二附属医院病理科; 生物医学信息工程教育部重点实验室西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No．30300305)
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目的本研究目的在于制备出高特异性的抗HPV16L1 IgY抗体,为HVPL1蛋白的检测提供一种方法,同时探讨IgY抗体在免疫组织化学中的应用。方法用纯化HPV1611蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法分离、纯化鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;小鼠红细胞凝集抑制试验检测抗体的特异性,采用免疫组织化学法通过对转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含 EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中 L1蛋白的检测评价IgY抗体的特异性。结果 3 次免疫之后,IgY抗体效价达到1:10240,同时可特异性抑制HPV16 L1 VLP引起的小鼠红细胞凝集,将其作为一抗可与转染pcDNAEGFP- HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的 CHO细胞中EGFP-HPV16L1结合。结论采用 HPV16L1蛋白免疫母鸡,成功获得了较高效价的特异性IgY抗体,并可用于HPV16L1蛋白的免疫组织化学检测,为IgY抗体在免疫组织化学检中的应用提供实验依据。
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