利用Piezo系统制备嵌合体小鼠

来源 :第六次全国动物生物技术学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cykic
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制备小鼠模型是当前生命科学与临床医学研究的重要工具和手段.建立胚胎干细胞介导的克隆小鼠或嵌合体小鼠的制备技术在转基因小鼠模型生产方面具有重要的应用价值.本研究利用Piezo显微操作系统,比较了不同注射针类型、口径对小鼠嵌合体制备效率的影响,结果发现,采用内径15-20um的平口注射针效果较好.本文利用该操作系统,将ES细胞(R1)注入受精3.5dpc的ICR小鼠囊胚中,经胚胎移植后成功获得毛色嵌合的嵌合体小鼠.共注射117枚胚胎,移植6只受体, 5只受体分娩(83.3%),出生仔数11只(9.4%),嵌合体5只(45.5%).显微注射分尖口针/平口针注射,后者利用Piezo系统进行,利用压电晶体管产生之快速震荡,使显微注射针产生一维之高频、细微冲击,将胚胎透明带轻易穿孔,可平稳可靠地进行操作,穿孔效率比尖口针要高.此系统在单精注射、动物克隆及转基因动物上已有广泛的应用.本实验表明此系统可快速制备嵌合体小鼠,为胚胎干细胞介导的转基因小鼠模型的制备奠定了基础.
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