制备新型前哨淋巴结示踪剂吲哚菁绿-利妥昔单抗的最佳质量比例研究

来源 :2015诺贝尔奖获得者医学峰会暨国际肿瘤研究高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ARCHERY6805068
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  目的 研究新型前哨淋巴结示踪剂吲哚菁绿-利妥昔单抗制备时,利妥昔单抗与吲哚菁绿耦联反应的最佳质量比例.方法 在室温中性环境条件下,将10 mg/ml利妥昔单抗溶液与2.5 mg/ml吲哚菁绿溶液按利妥昔单抗和吲哚菁绿的质量比为3∶1、4∶1、6∶1、12∶1、30∶1及32∶1的比例进行混匀,通过直接耦联反应制备吲哚菁绿-利妥昔单抗耦联物,之后对制备的耦联物进行离心、过滤、透析.按质量比3∶1进行耦联反应时,反应过程中出现明显沉淀,且离心后难以完全去除,该比例的偶联物未继续进行实验研究.经检测确定耦联物分子完整、免疫活性未破坏、无菌无热原且无急性毒性后,分别取不同比例耦联的吲哚菁绿-利妥昔单抗1μ1,注射于50只(每个浓度比例的小鼠有10只)无菌级小鼠前肢足垫皮下,用荧光脉管系统成像仪对小鼠进行持续显像,确定出现腋窝前哨淋巴结和次级淋巴结的时间.
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