【摘 要】
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为进一步研究猪戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框3(ORF3)蛋白抗原表位的分布特征,本研究利用噬茵体随机肽库淘选技术,对本实验室制备并保存的一株抗HEV ORF3单克隆抗体进行4轮淘
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东广州510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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为进一步研究猪戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框3(ORF3)蛋白抗原表位的分布特征,本研究利用噬茵体随机肽库淘选技术,对本实验室制备并保存的一株抗HEV ORF3单克隆抗体进行4轮淘选,最终获得8种在目标区域编码不同12肽的噬茵体.经氨基酸序列比对发现,8种多肽中均含有与ORF3蛋白C末端一致的序列,主要集中在VVDLP、VDLP以及DLP,其中VVDLP所占比例最高.结果同时发现,在VVDLP上下游还存在不连续氨基酸,与其相距位置与ORF3 C末端一致,所有筛选得到的疑似氨基酸序列集中位于ORF3 C末端97位至112位区域内.利用ELISA方法对5段合成的多肽SAPPLPPVVDLPQLGL、VVDLP、SAPPLPPVVDLP、VVDLPQLGL和SAPPLPPQLGL进行免疫活性检测,仅有SAPPLPPVVDLPQLGL和SAPPLPPVVDLP能够和单克隆抗体结合.综上所述,本研究得到HEV ORF3疑似表位VVDLP,其上序列SAPPLPP对其抗原具有影响.
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