论文部分内容阅读
为了建立一套标准的棉花SSR-PCR反应体系，本实验以TM-1和海岛棉海7124为实验材料，探讨了SSR技术中PCR体系的主要成分对扩增结果的影响，对SSR反应体系中的DNA模板浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度、dNTPs浓度以及退火温度进行了探索，确立了适合棉花的SSR反应体系为：10μL的PCR反应体系中，各成分的最佳浓度依次为：dNTP浓度为O.2 mmol·L-7,Taq酶浓度为0.5U，Mg2+浓度为2.5 mmol·L-1，DNA浓度为30～50 ng·μL-1，引物浓度0.7～100/xmol·L-1。退火温度在53～55℃为最佳。并利用该反应体系以10对SSR引物对两个材料进行PCR扩增，用8％的交性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，两个材料间DNA谱带清晰，而且多态性丰富，证实该体系稳定可靠。