【摘 要】
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目的 了解基因UHRF1的不同表达水平,对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制.方法 克隆形成实验观察细胞存活；流式细胞术测定细胞周期；利用DNA片段分析和
【机 构】
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苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院,苏州 215123
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目的 了解基因UHRF1的不同表达水平,对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制.方法 克隆形成实验观察细胞存活；流式细胞术测定细胞周期；利用DNA片段分析和AnnexinV试剂盒测定细胞凋亡；Western blot测定蛋白表达变化；利用经典的染色体分析,观察染色体畸变(着丝粒环和双着丝粒).结果 与对照组相比,UHRF1转染可将D0值由2.08Gy提高至3.17Gy,即降低MDA-MB-231细胞对X射线的辐射敏感性.利用siRNA抑制UHRF1的表达,可将X射线照射后细胞的生存率由41％降低至17％,即增强了细胞的辐射敏感性.UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和Ku80的表达水平,并且抑制X射线诱导的染色体畸变.结论 UHRF1的高表达,可以抑制细胞凋亡,促进DNA损伤修复,因此,可以通过抑制UHRF1的表达,作为临床提高乳腺癌放疗疗效的新靶标.
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