氨基酸键合相分离材料制备及应用

来源 :第21届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suaixin
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亲水作用色谱(HILIC)对极性化合物具有很好的分离选择性,在蛋白质组学、糖组学,天然产物和药物分析等领域发挥着重要的作用.亲水性色谱固定相是HILIC的关键,随着HILIC应用对象的不断拓展,现有亲水性色谱固定相的分离选择性还不能完全满足分离需求,因此需要发展新型的亲水性色谱固定相.近年来,为了提高分离选择性,同时具有亲水作用和静电作用等多重作用的HILIC/IEX混合模式色谱固定相已成为其发展方向之一.氨基酸是一类天然的两性离子,分子中至少含有一个氨基和一个羧基,具有较好的亲水性。同时,通过键合不同类型的氨基酸(酸性氨基酸和碱性氨基酸等),可以得到不同电荷性质的亲水性色谱固定相。本研究发展了一种氨基酸键合方法,通过氨基酸中的氨基基团与修饰有环氧基团的硅胶进行开环反应,将氨基酸键合到硅胶表面,从而制备得到一系列电荷性质可调的氨基酸键合相分离材料。同时,未与氨基基团反应的环氧基团会开环得到乙二醇基团,其具有很好的抗蛋白质非特异性吸附能力,能够抵抗复杂生物样品中蛋白质的干扰。对其中的组氨酸键合相分离材料进行了的色谱评价和表征。组氨酸键合相表现出典型的HILIC/IEX特性,具有亲水性好,选择性高和抗蛋白质干扰能力强的优点。将其用于人血清中唾液酸化的糖肽富集,共富集到487个糖基化位点,并且唾液酸化糖肽的的选择性高达73%,富集效果显著优于商品化的亲水性色谱固定相。
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