【摘 要】
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构建了两株O型口蹄疫病毒(FMDV)基因重组腺病毒,分别带有O/China/99 P1-2A-3C(adv-p12x3c)和P1-2A-3CD(adv-p12x3cd)基因.用这两株重组腺病毒分别免疫豚鼠,结果adv-p12x3c重
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州,730046
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构建了两株O型口蹄疫病毒(FMDV)基因重组腺病毒,分别带有O/China/99 P1-2A-3C(adv-p12x3c)和P1-2A-3CD(adv-p12x3cd)基因.用这两株重组腺病毒分别免疫豚鼠,结果adv-p12x3c重组腺病毒可以刺激豚鼠产生保护性的免疫反应,1×108～2×108 pfu的重组腺病毒肌肉注射免疫豚鼠,可以保护豚鼠抵抗10 000豚鼠半数感染量(GID50)的同型口蹄疫强毒的攻击,保护率分别达到5/6(83.3％)和6/6(100％).而相同免疫剂量的adv-p12x3cd重组腺病毒免疫组仅产生了部分的免疫保护,保护率仅为1/6.Ad5野生型腺病毒和PBS注射对照组均未产生任何的免疫保护效果.用5×108 pfu的adv-p12x3c重组腺病毒肌肉注射免疫猪,并以健康非免疫猪作为对照组.用液相阻断ELISA方法检测FMDV特异性抗体变化,用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况.在免疫后第28天,经肌肉接种攻击100个猪半数感染量(PID50)的FMDV猪体适应毒.经过11d的临床观察,结果,非免疫对照组猪于攻毒后24h即开始发病,至72h后对照组所有猪均出现典型的口蹄疫临床症状.而重组腺病毒免疫猪在攻毒后第7天仍表现正常,至第8天时其中的一头猪出现轻微的临床症状,其余的3头猪至第11天试验结束时仍表现正常,达到3/4保护.重组腺病毒免疫猪后可出现特异性的体液和细胞免疫应答.
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