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目的: 观察黄芪提取物(AE)对原代人胎肝细胞经冻存复苏后活性变化的影响,以探索改善人肝细胞冻存效果的新方法。
方法: 采用二步灌注法分离人胎肝细胞,将细胞分别以由不同浓度AE配制的五种冻存保护剂分组(Ⅰ:1096 DMSO、Ⅱ:5% DMSO+2mg/L AE、Ⅲ:5% DMSO+20mg/LAE、Ⅳ:5% DMSO+60mg/L AE、V:5%DMSO+100mg/L AE),冷冻保存1mo。1mo后快速复苏,进行细胞活率、形态学及基本功能检测。
结果: 人胎肝细胞在经不同保护剂冻存复苏后,其活率、形态学及功能表现有所不同,其中Ⅳ、Ⅴ组复苏后细胞的存活率和24h贴壁率,与Ⅰ组无显著差异(P>0.05),但显著高于Ⅱ、Ⅲ处理组(P<0.05);Ⅳ组复苏后细胞的白蛋白与天门冬氨酸转氨酶浓度测定、氯化铵转化试验结果显著优于其它各组(P<0.05)。
结论: AE可对原代人胎肝细胞冷冻保存有保护作用,其中60mg/L是最佳使用浓度;AE与二甲基亚砜联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用。