【摘 要】
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目的:建立一种检测粪便中LI的LAMP方法。方法:从190头可能感染LI的猪中采集190个粪便样本,LIB3909作为阳性对照。使用DNAzol提取试剂盒提取DNA。所提取的DNA作为模板进行LAMP和PCR反应。运用PrimerExplorer V4软件以aspA基因为模板设计4条引物(B3,F3,BIP和FIP),进行LAMP反应。所有的反应混合液在浑浊度仪中63℃孵育1小时,然后80℃处理2
【出 处】
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第22届国际猪兽医协会大会(IPVS2012)
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目的:建立一种检测粪便中LI的LAMP方法。方法:从190头可能感染LI的猪中采集190个粪便样本,LIB3909作为阳性对照。使用DNAzol提取试剂盒提取DNA。所提取的DNA作为模板进行LAMP和PCR反应。运用PrimerExplorer V4软件以aspA基因为模板设计4条引物(B3,F3,BIP和FIP),进行LAMP反应。所有的反应混合液在浑浊度仪中63℃孵育1小时,然后80℃处理2分钟。根据反应液颜色变化判定结果,紫色为阴性,天蔽色为阳性。结果:LAMP检测结果显示97.4%粪便样品为阳性,PCR检测阳性率为96.3%。两种方法之间的符合率为98.9%。结论:LI LAMP是诊断PE的有用工具。
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本文选用经检测为PCV2抗原抗体含量较低的断奶仔猪作为实验对象,抽提PCV2病毒核酸,并拯救出PCV2病毒。回收后的DNA用基因注射枪经猪耳后注射入4周龄断奶仔猪体内。每日给予猪20mg/kg的环孢霉素A作为免疫调节物,每周采血两次,并用荧光定量PCR分析抗原含量,相关试剂盒检测特异性的IgM抗体和IgG。36天后猪安乐死,检测血清PCV2抗原和抗体。结果:在PCV2核酸注射后12天,PCV2抗原
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