【摘 要】
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试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5`端修饰生物素，另一条探针3`端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合，形成“生物素化探针．靶核酸一纳米金探针”复合物，该复合物通过生物素-亲和素系统，固定在固相载体上，最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所国家动物营养学重点实验室／农业部兽用药物与兽医生物技术北京科学观测实验站，北京 100193
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会
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试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5`端修饰生物素，另一条探针3`端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合，形成“生物素化探针．靶核酸一纳米金探针”复合物，该复合物通过生物素-亲和素系统，固定在固相载体上，最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观察法、分光光度法分析银染灰度，从而间接测定靶核酸的量。初步检测PPRV核酸最低浓度达10 fhlol／L，所需时间约为1.5 h。该方法灵敏度高，操作简单，为临床检测小反刍兽疫病毒核酸提供实验数据和技术支持。
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