【摘 要】
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目的 了解HIV-1感染孕妇胎盘的超微结构变化,探索病毒是否可以感染胎盘及其在胎盘中的定位,对比分析抗逆转录药物治疗对病毒感染胎盘的影响；探索HIV-1以何种方式感染滋养细胞,病毒在滋养细胞中是否存在复制及CCR5、CXCR4和DC-SIGN在病毒入胞过程中的作用.方法 收集11例HIV-1感染孕妇胎盘为病例组,13例正常孕妇胎盘为对照组,进行HIV-1 P24抗原的免疫组化检测和激光扫描共聚焦显
【机 构】
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暨南大学医学院流行病学教研室 中山大学附属第六医院新生儿科
【出 处】
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2013国际新生儿重症监护学高峰论坛
论文部分内容阅读
目的 了解HIV-1感染孕妇胎盘的超微结构变化,探索病毒是否可以感染胎盘及其在胎盘中的定位,对比分析抗逆转录药物治疗对病毒感染胎盘的影响；探索HIV-1以何种方式感染滋养细胞,病毒在滋养细胞中是否存在复制及CCR5、CXCR4和DC-SIGN在病毒入胞过程中的作用.方法 收集11例HIV-1感染孕妇胎盘为病例组,13例正常孕妇胎盘为对照组,进行HIV-1 P24抗原的免疫组化检测和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察；选择其中的4例HIV-1感染孕妇胎盘和2例正常孕妇胎盘进行透射电子显微镜(TEM)观察.利用人绒毛膜癌JEG-3细胞株和BeWo细胞株分别与游离病毒和感染有HIV-1 ⅢB的C8166(T)细胞共培养,通过PCR检测细胞基因组DNA中是否有HIV-1 gag基因的整合,以验证病毒进入滋养细胞的可能性；应用ELISA法检测培养上清中的HIV-1 P24抗原,以证实是否有子代病毒的释放.流式细胞仪检测人绒毛膜癌JEG-3和BeWo细胞株表面CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子的存在情况,利用抗体阻断实验分析它们在病毒入胞机制过程中的作用.结果 两组胎盘标本在普通显微镜下均未发现HIV-1 P24抗原的免疫组化阳性表达；LSCM发现病毒定位于滋养细胞、间质细胞和胎儿血管内皮细胞；TEM发现在1例未接受抗病毒药物治疗的HIV-1感染孕妇胎盘滋养细胞内有约100nm大小的病毒样颗粒结构存在.通过PCR和ELISA检测发现,游离病毒不易感染滋养细胞系；与被感染的T细胞共培养,HIV-1 ⅢB可以进入并整合到滋养细胞遗传物质中；感染后培养48小时检测到子代病毒的复制与释放,72小时呈增加趋势；滋养细胞系低水平表达CCR5、CXCR4和DC-SIGN,但抗体阻断实验不能阻止HIV-1对滋养细胞的感染.结论 本研究从组织学形态层面证实,在HIV-1感染孕妇,病毒可以感染胎盘的滋养细胞,病毒在胎盘中主要定位于滋养细胞、胎盘的间质细胞和胎儿血管内皮细胞.接受抗病毒药物治疗的HIV-1感染孕妇胎盘中没有发现类似病毒颗粒与超微结构的改变,提示产前干预在阻断HIV-1感染垂直传播可能具有重要意义.胎盘组织中存在HIV-1各种受体分子,具备感染HIV-1的分子基础.CCR5、CXCR4及DC-SIGN分子在晚孕胎盘中的表达较高,可能是HIV-1感染宫内传播多发生于孕晚期的原因之一.滋养细胞系不易被游离的HIV-1感染,与被感染的T细胞系共培养可以提高滋养细胞易感性,病毒可在滋养细胞中存在复制.
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