【摘 要】
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目的：明确成肌细胞外泌体对成骨细胞成骨分化的促进作用,并研究成肌细胞外泌体miRNA 促进成骨分化的作用机制。方法：建立成肌分化诱导模型并筛选主要调节miRNA；外泌体示踪和
【机 构】
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济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院,山东济南250020;山东省医药生物技术研究中心山东省医学科学院,山东济南250062山东省医药生物技术研究中心山东省医学科学院,山东济南250062
【出 处】
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第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会年学术交流会
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目的：明确成肌细胞外泌体对成骨细胞成骨分化的促进作用,并研究成肌细胞外泌体miRNA 促进成骨分化的作用机制。方法：建立成肌分化诱导模型并筛选主要调节miRNA；外泌体示踪和实时荧光定量PCR检测外泌体介导miRNA 进入成骨细胞；以氢化可的松、β-磷酸甘油、抗坏血酸配制成骨诱导液,实验组加入外泌体,建立成骨诱导模型,通过茜素红染色、ALP 活性检测、实时荧光定量PCR 检测成骨标志基因(ALP、Runx2、OCN)表达水平以鉴定模型建立；下调miR-27A后,以成骨诱导液为基础,与加入正常外泌体实验组分别建立成骨诱导模型,通过茜素红染色、ALP 活性检测等不同成骨分化指标的检测,验证其对成骨诱导模型的影响；基因芯片筛选主要调控信号通路,Western-Blotting、免疫荧光验证信号通路中靶蛋白APC 和β-catenin 表达水平和位置变化。
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