【摘 要】
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量子点(Quantum Dots,QDs)又称为半导体纳米晶体,是一种新型的荧光探针.与传统有机荧光染料和荧光蛋白相比,QDs 具有独特的光化学特性,如高的量子产率、可调控的吸收和发
【机 构】
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浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004
【出 处】
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第八届全国微全分析系统学术会议、第三届全国微纳尺度生物分离分析学术会议暨第五届国际微化学与微系统学术会议
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量子点(Quantum Dots,QDs)又称为半导体纳米晶体,是一种新型的荧光探针.与传统有机荧光染料和荧光蛋白相比,QDs 具有独特的光化学特性,如高的量子产率、可调控的吸收和发射光谱、窄的发射谱带、良好的化学和光稳定性.近年来基于量子点的荧光分析法已在生物分析领域得到了广泛应用[1,2].毛细管电泳作为一种高灵敏、高分辨及低样品消耗的微分离技术,在生物分析领域具有广阔的应用前景[2,3].本文以谷胱甘肽(GSH)为稳定剂,合成了CdTe QDs,探讨了GSH-CdTe QDs与溶菌酶之间的偶联条件,用毛细管电泳-激光诱导荧光检测技术对量子点及其溶菌酶生物共轭物进行分离分析.利用紫外、荧光、红外、透射电镜等技术对合成的GSH-CdTe QDs进行表征,结果表明,GSH-CdTe QDs粒径大小分布均匀,在523nm处有紫外吸收,540nm处有一窄而强的荧光发射峰.以EDC(碳二亚胺盐酸盐)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)为连接剂,将量子点与溶菌酶进行生物偶联,探讨了偶联剂用量、缓冲溶液类型及pH 对偶联效果的影响,得到了最佳偶联条件：缓冲溶液KH2PO4-Na2HPO4,pH 7.4,20 μL 2.8×10-3 mol/L CdTe,30μL 25mg/mL EDC,30μL 1.5mg/mL NHS,40μL 1mg/mL溶菌酶.研究了缓冲溶液的浓度和pH、分离电压及温度对量子点及其生物共轭物分离的影响,最终在10mmol/L的硼砂缓冲溶液(pH 9.25)中,分离电压20kV,温度25℃的条件下,GSH-CdTe量子点及其标记物能有效分离(图1).该法可用于生物样品中痕量溶菌酶的标记检测.
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