【摘 要】
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目的:诱导白血病细胞分化是治疗白血病的有效途径,而治疗靶点或信号通路的选择是诱导分化疗法的关键。有研究表明泛素包含结构域1(ubiquitin domain-containing 1,UBTD1)在肿
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目的:诱导白血病细胞分化是治疗白血病的有效途径,而治疗靶点或信号通路的选择是诱导分化疗法的关键。有研究表明泛素包含结构域1(ubiquitin domain-containing 1,UBTD1)在肿瘤组织中表达较低,与肿瘤恶性程度和预后负相关,但其在白血病中的表达和功能尚不清楚。方法:用PMA诱导HL-60、THP-1细胞向巨噬细胞分化,采用细胞形态学和流式细胞术(FACS)检测特异分化抗原确定诱导分化模型的建立。在此基础上,构建UBTD1和肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(peptidylarginine deiminase 4,PAD4/PADI4)的过表达质粒,并转入THP-1细胞,利用荧光定量PCR(q RT-PCR)检测UBTD1、PADI4在PMA诱导HL-60、THP-1细胞的mRNA表达情况,检测C/EBPα、C/EBPβ、PU.1等重要转录因子的表达情况。结果:我们检测了UBTD1在PMA诱导HL-60、THP-1细胞的表达,发现PMA诱导HL-60细胞第3天UBTD1表达提高,而PMA诱导THP-1细胞第1天UBTD1表达就显著提高,与我们PMA诱导HL-60细胞向巨噬细胞分化的mRNA芯片结果一致。通过基因芯片信号通路基因关联分析,我们发现UBTD1与PADI4密切相关。通过转入THP-1细胞UBTD1和PADI4的过表达质粒,转入THP-1细胞后发现UBTD1过表达组的PADI4基因表达明显提高(P<0.01);转入THP-1细胞24h后PMA诱导48h时同样发现UBTD1过表达组的PADI4基因表达明显提高(P<0.01)。我们发现UBTD1过表达能够诱导PADI4表达明显提高,并能提高C/EBPα、C/EBPβ、PU.1等重要转录因子的表达。结论:我们的研究表明UBTD1可能在白血病细胞分化为巨噬细胞中发挥了重要作用,可能为白血病的诱导分化治疗提供了新的潜在治疗靶点。
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