姜黄素对多发性骨髓瘤细胞系表达P53蛋白影响的研究

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目的:研究姜黄素在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞中调控癌基因及抑癌基因的表达,为姜黄素的临床应用提供更多的实验证据。方法:绘制生长曲线:分别用0μmol/L、2.5μmol/L、5κmol/L、7.5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L、4μmol/L浓度的姜黄素处理多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226,分别在0h、24h、48h、72h、96h对多发性骨髓瘤细胞计数,绘制生长曲线,观察用不同浓度姜黄素处理的RPMI8226细胞生长相对速度。采用MTT法检测不同浓度姜黄素在不同时间对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226细胞的增殖抑制作用。应用Real-time PCR方法检测姜黄素处理后的多发性骨髓瘤细胞的凋亡相关基因p53、bax、MDM2的表达变化。用Elisa方法检测姜黄素处理后的多发性骨髓瘤细胞RPMI8226表达P53蛋白的变化。采用SPSS17.0统计分析软件进行分析,对照组和各个实验组之间采用单样本和独立样本t检验,检验水准α=0.05,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果:生长曲线示:随着姜黄素浓度的增加,多发性骨髓瘤细胞RPMI8226细胞的增殖变慢,在浓度≥15μmol/L时,细胞几乎看不到增殖。MTT结果示:姜黄素可抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖,并且这种抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性,各实验组与对照组OD值的差异有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR示:姜黄素处理后的多发性骨髓瘤细胞RPMI8226,p53、bax基因表达上调,MDM2基因表达下调,实验组与对照组表达差异显著(P<0.05)。ELISA法示:用10μmol/L和15μmol/L姜黄素处理多发性骨髓瘤细胞RPMI8226细胞48h后,P53蛋白表达水平上升,且15μmol/L姜黄素实验组的P53蛋白表达高于10μmol/L姜黄素实验组的P53蛋白表达水平。实验组与对照组P53蛋白的表达差异显著(P<0.05)。结论:在一定的浓度范围之内,姜黄素对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞的生长具有抑制作用,并通过上调P53蛋白表达促进骨髓瘤细胞凋亡。
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