高车前素对骨肉瘤MG63细胞凋亡和自噬的影响及其相关作用机制

来源 :中华医学会第十七届骨科学术会议暨第十届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wumoxiao
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  目的:探讨高车前素对骨肉瘤MG63细胞的影响以及发挥作用的相关信号通路.方法:培养骨肉瘤MG63细胞,96孔板造模,分别加入不同浓度的高车前素,5%CO2,37℃孵育24h,MTT检测细胞活力;同样,在MG63细胞中加入不同浓度的高车前素,RT-PCR和免疫印迹方法检测Bax和Bcl-2水平;免疫印迹方法检测细胞凋亡蛋白procaspase-3、caspase-3、procaspase-9、caspase-9、PARP在加入不同浓度高车前素的细胞中蛋白的表达情况,以及Bax和Bcl-2水平;将20只雄性Wistar大鼠随机分成5组,对照组(5只)、12.5μM高车前素(5只)、25μM(5只)、50μM(5只),采用免疫组织化学方法进行石蜡包埋肿瘤组织切片,TUNEL染色法检测细胞凋亡数量;RT-PCR和免疫印迹方法检测Atg-5、Beclin-1、LC3-Ι和LC3-蛋白水平表达情况.
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