VBNC沙门菌突变体AFLP与DHPLC分析

来源 :第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caoyouwen
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为准确了解沙门菌受NTG及VBNC条件作用,其基因组发生突变的情况.本研究用Msel和EcoRI两种酶对VBNC沙门菌突变体基因组DNA进行酶切,酶切产物与接头连接后,依次进行了预扩增和选择性扩增.扩增产物经8%PAGE电泳与DHPLC检测后,分别获得AFLP与DHPLC图谱.两图谱综合分析结果显示,突变体存在1条大约200bp的特异性条带,是典型的分子标记.整个AFLP图谱共扩增出108条带,这些片段分布在29个不同位置,其中突变体平均在每个泳道上出现19.3条谱带,而原菌则平均出现12条.而且突变体还在20个不同位置上还具有多态性条带,多态性为68.96%(20/29),说明突变体与供体的基因组多态性存在差异.统计分析表明,突变体组间的重复率为96.6%,组内平均重复率为96.55%,说明AFLI,图谱具有较高的重复性与稳定性.上述结果充分证实沙门菌因在受到NTG及VBNC条件作用后,其基因组发生了突变,并存在1个分子标记,可用VBNC沙门氏突变体的快速鉴定.
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