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为了配合新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNF)的临床研究,建立nrhTNF的发酵工艺,该文首先研究了nrhTNF工程菌在试管和三角摇瓶中的生长和表达规律,筛选确定了其最适宿主菌、最佳培养基及最佳诱导表达条件,然后对DH5a/pBV-TNF工程菌在5L自控发酵罐中进行了分批补料培养,结果表明,该工程菌培养至终密度30A<,600nm>左右时,目的蛋白的表达可保持在菌体总蛋白的50℅附近,发酵时间在12~13h之间;随着菌体密度增高,目的蛋白的表在量逐渐降低,至60A<,600nm>时,nrhTNF的表达仅占菌体总蛋白的10℅左右。根据以上研究结果确定了周期短,产量高且稳定可靠的发酵工艺,为nrhTNF的工业化生产奠定了基础≈