猪流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究

来源 :中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:keyina
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究猪流感病毒复合多表位核酸疫苗的构建及其表达产物的抗原性.方法:根据各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,H5、H7亚型的HA全基因,流感病毒的其他主要抗原(NP、NA、M)表位基因为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765bp的复合多表位基因Epj,将其克隆入真核表达载体pRIEneo,构建重组质粒pRI-Epi;将多表位抗原基因Epi插入到融合表达基因H57中,构建重组质粒pRI-H57-Epi.将构建的重组质粒在Hela细胞中表达,并用免疫荧光方法初步检测该抗原蛋白的抗原性.结果:成功构建了融合表达载体pRI-Epi和pRI-H57-Epi,在Hela细胞中表达出流感病毒多表位抗原蛋白,免疫荧光法检测显示该蛋白具有良好抗原性.结论:流感病毒多表位抗原基因的设计是成功的,其在Hela细胞中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的猪流感疫苗候选物.
其他文献
目的:了解中国人肝豆状核变性患者ATP7B基因第18外显子的突变情况,以期为该病的基因诊断提供依据.方法:采用PCR-SSCP技术对患者及健康对照组的DNA扩增片断进行筛选,对其中异
链球菌(Streptococcus)是化脓性球菌的一类常见的细菌,广泛存在于自然界和人及动物粪便、鼻咽部以及泌尿生殖道,致病性链球菌可引起多种动物和人的化脓性炎症.尤其是肺炎链球
会议
目的:观察急性脑梗死镁钙含量的变化,探讨其潜在机制.方法:用栓线法制成大脑中动脉阻塞梗死模型(MCAO),在MCAO后6h、12h分别测定梗死侧、对侧脑皮质匀浆及血清镁、钙含量.结
用PCR方法配合生化鉴定,从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(progressiveatrophicrhinitis,PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66株多杀性巴氏杆菌(pasteurelamultocida,Pm).然
会议
目的:观察乙醇对于Na~+依赖高亲和摄取L-[~3H]谷氨酸(预孵育4main+孵育2min)的影响.方法:采用4个鼠龄段大鼠大脑皮层突触体.结果:大剂量(包括522mmol?L~(-1)及348mmol?L~(-1)
目的:探讨RHR脑梗死后病灶边缘额、顶叶皮层脑组织突触体内[Ca~(2+)]_i水平及其对神经生长因子(NGF)治疗的变化.方法:用Fura-2荧光标记,测定分离突触体内[Ca~(2+)]_i.结果:在
以PK15细胞为模型,研究了不同浓度的硒蛋氨酸对猪细小病毒体外复制的抑制作用.结果表明:在2~8μmol/L范围内,硒蛋氨酸对细胞生长没有影响,但对猪细小病毒的体外复制呈现显著的
利用自行设计的引物,通过RT-PCR方法扩增出本实验室分离到的一株H3N2亚型猪流感病毒(简称SGD2)HA、NA基因,然后分别将其克隆到pMD18-T载体中.氨基酸序列分析发现HA、NA有多个
会议
以猪链球菌2型SS2-H株为指示菌,用双层琼脂法,从健康猪的鼻拭子样本中分离到一株猪链球菌的噬菌体,定名为SMP,对其热稳定性、pH稳定性等生物学特性等进行了研究.SMP的蚀斑透
会议
本文研究了来源于不同前体物的一氧化氮(nitrooxide,NO)对猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPV)体外增殖的影响.结果表明,NO前体物S-硝基-N-乙酰青霉胺(SNAP)、L-精氨酸(L-Arg)
会议