论文部分内容阅读
分别采用体外转录和RNA酶Ⅲ消化长片段双链RNA的方法制备了以8条以狂犬病毒(RV)PV株N基因作为靶基因的21nt小干扰RNA和RV-N基因小于扰RNA库，并证实不同21nt小干扰RNA均对狂犬病毒PV株产生了程度不同的强抑制作用。在此基础进一步观察了不同小干扰RNA对异源毒株CVS株和CTN株的抑制效果。
结果表明，在21nt吐小干扰RNA与靶mRNA碱基错配高达5个的情况下仍对病毒保持高抑制率。然而，siRNA与靶mRNA碱基错配的位置与抑制作用的丧失高度相关。3端第二个碱基的错配将使抑制作用表失，3端以后的碱基错配对抑制率的影响依次降低，siRNA中部硷基与靶基因的错配对抑制率的影响较小，5端碱基错配基本没有影响。这一结果为本研究提出了RNAi抑制作用的广谱性，偏靶效应等问题，并为设计独特的siRNA序列提供了依据。