【摘 要】
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目的 探讨雌马酚是否可通过质膜上雌激素受体与胞内细胞信号相互作用发挥非经典的雌激素效应及其具体分子过程仍不清楚。方法 检测细胞增殖：MTT实验；检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)信号通路激活：Western blot检测总Akt和磷酸化Akt (p-Akt)的表达水平；检测ER的转录活性：荧光素酶报告基因实验；检测ER的功能：qRT-PCR检测pS2 mRNA表达水
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院,江苏南京210029
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目的 探讨雌马酚是否可通过质膜上雌激素受体与胞内细胞信号相互作用发挥非经典的雌激素效应及其具体分子过程仍不清楚。方法 检测细胞增殖：MTT实验；检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)信号通路激活：Western blot检测总Akt和磷酸化Akt (p-Akt)的表达水平；检测ER的转录活性：荧光素酶报告基因实验；检测ER的功能：qRT-PCR检测pS2 mRNA表达水平。结果 雌马酚对ERα阳性MCF-7细胞的增殖调控呈双相效应——即低剂量可刺激细胞增殖,高剂量主要抑制细胞增殖,然而在ERα阴性MDA-MB-231细胞中,雌马酚则剂量依赖性抑制细胞增殖,结果提示ERα在低剂量雌马酚诱导乳腺癌细胞增殖过程中发挥重要作用；低剂量雌马酚可时间依赖性上调MCF-7细胞p-Akt和pS2 mRNA的表达水平,而不影响总Akt,用wortmannin(PI-3K抑制剂)预处理MCF-7细胞后,可阻滞雌马酚所致pS2 mRNA表达升高和细胞增殖,在MDA-MB-231细胞中,未观察到雌马酚处理对p-Akt和pS2 mRNA的表达水平的影响,而在MDA-MB-231细胞中高表达ER后,PI-3K抑制剂可阻滞雌马酚对ERα转录活性及靶基因pS2 mRNA表达的增强作用,结果提示PI-3K/Akt信号通路在雌马酚激活ERα过程中发挥重要作用；在MCF-7细胞中ICI(ER拮抗剂)可阻滞雌马酚对p-Akt的激活,而在MDA-MB-231细胞中,ICI不影响p-Akt及总Akt的表达,结果提示ERα在雌马酚激活PI-3K/Akt信号通路过程中发挥重要作用。结论 ERα-PI-3K调控环路在雌马酚诱导乳腺癌细胞增殖过程中发挥重要作用。
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