【摘 要】
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Fat(Fatty acyl-ACP thioesterase)基因是植物脂肪酸合成中决定碳链长度的关键酶,根据Genebank中几个物种FatB型基因保守区设计引物,采用简并PCR,RACE等方法,从香叶树发
【机 构】
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北京林业大学京林业大学树木系统分类与生物地理研究室 100083
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Fat(Fatty acyl-ACP thioesterase)基因是植物脂肪酸合成中决定碳链长度的关键酶,根据Genebank中几个物种FatB型基因保守区设计引物,采用简并PCR,RACE等方法,从香叶树发育中的果实中克隆得到FatB基因的cDNA全长,并对其进行生物信息学及原核表达分析,结果表明该cDNA全长1854bp,阅读框为1260bp,编码419个氨基酸,序列同源性分析表明该氨基酸序列与Myristica fragrans,Ricinus communis,Theobroma cacao,Jatropha curcas 的FatB 氨基酸序列同源性达77％,73％,71％,71％,将FatB 基因cDNA 片段与pET30a 构建原核表达载体,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),1mmol/LIPTG诱导5h后,在预期大小蛋白分子量46kD处出现一条加强表达的蛋白条带,表明香叶树FatB基因大肠杆菌E.coli BL21成功表达.这些结果为将来提高和改善香叶树果实油含量及成分的研究提供了一个基础.
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