刚地弓形虫TgAtg8-TgAtg3蛋白-蛋白相互作用的分子机制研究

来源 :中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oldfly2005
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  目的:探讨介导刚地弓形虫TgAtg8 与TgAtg3 蛋白相互作用的分子基础。方法:首先,我们根据TgAtg8 蛋白空间结构,针对两个口袋结构域中特异性氨基酸位点分别进行突变,原核表达3 种TgAtg8 突变融合蛋白:HA-TgAtg8R27E、HA-TgAtg8D44A/K45S/K46A 和HA-TgAtg8△68-76,进而利用体外pull-down 与Western blot 实验分别检测上述TgAtg8 突变蛋白与His×6-TgAtg3 融合蛋白的结合能力,以HA-TgAtg8 野生型蛋白作为对照,明确TgAtg8 蛋白中介导TgAtg8-TgAtg3蛋白-蛋白相互作用的氨基酸位点。
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