波尔山羊胚胎移植关键技术研究

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波尔山羊是目前世界公认的最优秀的肉用山羊品种之一,利用胚胎移植技术快繁快育波尔山羊对加快我国肉用山羊发展意义重大。本试验主要研究北京地区波尔山羊胚胎移植技术中的关键技术环节:超数排卵和同期发情,以提高波尔山羊胚胎移植的效率,为我国肉山羊胚胎移植技术产业化发展做出贡献。一、超数排卵技术试验研究1.波尔山羊繁殖季节试验:供体经产波尔山羊98只,采用CIDR+FSH+P4超排程序,分别在北京地区的三个试验场试验研究。结果表明,同一试验场内10~12月份可用胚比率均极显著高于4~7月份(p<0.01);不同试验场间差异不显著(p>0.05)。2.非繁殖季节不同超排方法的试验:采取FSH+PG+LRH-A3、PG+E2+FSH+PG+LRH和CIDR+FSH+PG+LRH供体经产波尔山羊33只在非繁殖季节(4~7月份)进行超排处理,结果发情率CIDR+FSH+PG+LRH显著高于FSH+PG+LRH-A3(p<0.05);平均回收胚数CIDR+ FSH+PG+LRH极显著地高于FSH+PG+LRH-A3和PG+E2+FSH+PG+LRH(p<0.01);平均有效胚数CIDR+FSH+PG+LRH极显著地高于FSH+PG+LRH-A3和PG+E2+ FSH+PG+LRH(p<0.01)。这表明CIDR+FSH+PG+LRH-A3方法在非繁殖季节超排效果最佳。3.波尔山羊不同年龄超排效果实验:在繁殖季节选择育成波尔山羊20只、不同胎次经产波尔山羊67只进行研究,结果经产2-4胎的波尔山羊超排效果平均冲胚数、平均可用胚数、可用胚比率极显著地高于10-12月龄育成羊(p<0.01);3~4岁可用胚比率与1~2岁及5~6岁超排效果存在显著差异(p<0.05),1~2岁年龄组与5~6岁年龄组之间差异不显著(p>0.05)。3~4岁年龄段的波尔山羊超排效果最好。4.FSH和PMSG不同激素超排效果比较试验:在繁殖季节选择波尔山羊20只对波尔山羊分别实施FSH与PMSG不同激素进行超数排卵。结果FSH处理组的平均排卵点和回收胚平均数均优于PMSG(p<0.05);FSH处理组胚胎回收平均数和可用胚胎极显著高于PMSG处理组(p<0.01)。5.不同超排方法比较试验:在繁殖季节选择供体经产波尔山羊48只,分组采用CIDR—FSH—PG、CIDR—FSH—PG+HCG和FSH—PG3种不同超排方法,结果表明:CIDR—FSH—PG组的获胚平均数、可用胚平均数均极显著高于CIDR—FSH—PG+HCG组和FSH—PG组(p<0.01)。CIDR—FSH—PG组的可用胚比率均显著高于CIDR—FSH—PG+HCG组和FSH—PG组(p<0.05)。3种不同超排方法以CIDR+FSH+PG超排效果显著。6.FSH不同来源与剂量比较试验:在繁殖季节选择供体经产波尔山羊93只,对FSH不同来源的生产厂家(分别为加拿大、澳大利亚、新西兰、杭州市、中科院动物所)与同厂家施用不同剂量。结果表明:同一产地的FSH施用波尔山羊超排有较佳效果的剂量:澳大利亚产40IU/只/次(p>0.05),加拿大产20mg/只/次(p>0.05),新西兰产60IU/只/次(p>0.05),宁波市产40IU/只/次(p>0.05),中科院动物所产8mg/只/次(p>0.05)。不同产地FSH较佳施用剂量之间在可用胚比率上差异不显著(p>0.05)。7.供体波尔山羊重复超排试验:在繁殖季节选择供体经产波尔山羊112只次,在3个试验场连续3年,每年对供体手术一次进行胚胎回收和移植。结果3组试验回收胚总数、平均胚回收率、头均可用胚数、生殖器官粘连羊总数第1、2、3次重复超排手术间无差异(p>0.05)。二、同期发情技术试验研究1.供体与受体间血项指标对胚胎移植影响试验:选择健康波尔山羊公羊7只、供体波尔山羊母羊9只、受体马头山羊母羊25只及胚胎移植后代羊11只,分别采血做血项测定。结果移植后代羊在RBC、PCV、Hb、WBC、MCV及MCH均显著高于供体公羊、供体母羊和受体羊(p<0.05),而供体公羊、供体母羊与受体羊之间在所测定血项差异不显著(p>0.05)。说明受体山羊仅为胚胎发育提供环境及营养。2.受体羊同期发情季节试验:受体马头山羊288只,分别在春夏秋冬各季试验。结果同期发情的发情率秋季组与春、夏、冬季相比差异极显著(p<0.01),春季与夏季、冬季间差异不显著(p>0.05);妊娠率秋季与冬季均极显著地高于春季和夏季(p<0.01),春季与夏季之间差异不显著(p>0.05),秋季与冬季之间差异不显著(p>0.05);产羔率秋季极显著地高于春季、夏季和冬季(p<0.01)。本试验表明受体羊同期发情处理秋季和冬季效果最好。3.不同品种受体同期发情比较试验:受体羊为从不同地区购入的3个地方品种(萨能奶山羊、唐山奶山羊和马头山羊)青年母羊115只,受体不同品种间发情率、妊娠率和产羔率均差异不显著(p>0.05)。表明山羊不同品种受体同期发情效果没有明显差别。4.受体重复利用效果试验:受体羊为马头山羊124只次,连续3年,每年对受体手术一次进行胚胎移植。结果受体一次使用与重复使用的妊娠率及产羔率无显著差异(p>0.05)。表明手术方法对受体胚胎移植重复使用3次不影响移植效果。5.同期发情不同处理方法比较试验:选择马头山羊和经产土种山羊277只,分别施用CIDR-FSH、CIDR-FSH-PG、CIDR-PSMG-P4+VC同期发情处理方法,采用CIDR+PMSG+P4+VC同期发情处理方法同期发情率显著高于CIDR-FSH和CIDR+FSH+PG处理(p<0.01)。6.同期发情的同期化与配比试验:供体为经产波尔山羊36只,受体羊为山东本地山羊61只。结果供体羊的发情开始时间为33.7小时,受体羊的发情开始时间为41.1小时,同期发情受体羊长于供体羊(p<0.05);超排发情供体羊、同期发情受体羊之间发情持续期差异不显著(p>0.05);受体羊的撤栓时间应与供体羊同时进行或比供体羊早10小时;超排1只供体应同时处理受体7-9只。一般以每批处理6-10供体和50-80只受体。7.胚胎质量等级、发育阶段、移植数量:选择经产波尔山羊的鲜胚分组按移植单胚和双胚的不同质量、同级质量而不同发育阶段和不同发育期胚胎(细胞数)的胚胎移植,结果单胚A级妊娠率极显著高于C级(p<0.01),B级胚胎显著高于C级(P<0.05),A级胚胎与B级胚胎差异不显著(p>0.05);双胚妊娠率,质量等级不同的胚胎搭配移植,移植妊娠率无明显差异。(p>0.05);同级质量而不同发育阶段移植产羔率囊胚阶段移植产羔率显著地高于桑椹胚阶段(p<0.05),其它各阶段间在移植产羔率上差异不显著(p>0.05);胚胎发育期(细胞数)为4的妊娠率显著地高于胚胎发育期(细胞数)为1和2-3的妊娠率(p<0.05)),其它不同胚胎发育期间在妊娠率上差异不显著(p>0.05)。表明囊胚和早期囊胚移植的妊娠率和产羔率都高。A,,B级胚胎移植成羔率较好C级胚成羔率低。
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