角膜是位于眼球前壁的一层透明膜,共有五层。其中,内皮层是由单层六角形的内皮细胞组成,内皮细胞具有屏障和液泵功能,对维持角膜正常厚度和透明性发挥极其重要的作用。人类的角膜内皮细胞在体内的增殖能力有限,轻度损伤后通过损伤区周围细胞的移行而修复,重度损伤则容易导致内皮失代偿,从而影响其功能。苯扎氯胺(BAC)是眼药剂中常用的防腐剂。研究表明,高浓度的BAC对角膜上皮细胞及基质细胞具有毒性,而低浓度的BAC却可以促进角膜基质细胞的增殖。有文献报道,BAC可以影响角膜内皮细胞间的紧密连接,但其是否也可以促进角膜内皮细胞的增殖还未见报道。因此我们的实验目的是探究苯扎氯胺是否可以促进角膜内皮细胞的增殖及其作用机制,从而为临床上治疗角膜内皮细胞损伤提供一种新的思路。实验方法采用原代培养的兔角膜内皮细胞(CECs),予以不同浓度的BAC处理不同的时间,通过CCK8增殖实验,Ki67,ZO-1免疫荧光染色,PCR,Western Blot等技术探究BAC对CECs增殖和紧密连接的作用以及其与作用时间和浓度的关系。同时建立兔角膜内皮损伤模型,用不同浓度的BAC处理损伤的内皮不同的时间,通过裂隙灯拍照,Ki67,ZO-1免疫荧光染色等探究BAC对损伤的CECs的作用以及其与作用时间和浓度的关系。