短期变重力导致的细胞结构和功能改变

来源 :2006国际骨质疏松—骨与关节大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Leon_prog
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目的:微重力引起骨丢失的机理尚不完全清楚.本文研究了失重飞机的短期变重力对细胞结构和功能的影响,探讨成骨细胞如何响应重力变化. 方法:成骨细胞ROS17/2.8和EGFP-ROS细胞搭载了法国空客A300失重飞机,收集细胞培养上清,多聚甲醛固定细胞或Trizol裂解细胞.放射免疫测定培养上清中骨钙素的含量,改良钙钴法分析成骨细胞的碱性磷酸酶活性.RT-PCR法检测了飞行后骨钙素、COL1A1和ALP的表达变化.用荧光双染法,分析成骨细胞微丝F-actin、G-actin和磷酸化p42/44的分布状态和定位情况.荧光半定量法分析不同处理(细胞松弛素或PD98059)后EGFP-ROS细胞的荧光强度变化. 结果:经过3个小时的飞行,成骨细胞微丝系统发生重排,F-actin变粗、方向性增强;G-actin分布相对集中在中央.成骨细胞的功能下降,骨钙素分泌降低;碱性磷酸酶活性以及它们的mRNA表达下降.磷酸化的p42/44(绿色)和重排的F-actin(红色)荧光图象重叠后,大部分绿色区域成黄色,说明活化的Erk共定位于F-actin.抛物线飞行轻微的提高了EGFP-ROS的荧光强度,但是PD98059处理后,荧光强度显著降低. 结论:短时间重力变化导致细胞骨架重排和功能下降;而且在细胞骨架适应重力变化过程中,ERK信号通路与F-actin重排之间存在偶联.
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