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为了构建由双CMV启动子调控的真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB，首先在pcDNA3.1(+)的基础上，构建出pcDNA3.1A和pcDNA3.1B，通过PCR方法扩增pcDNA3.1A上含-PCMV-MCS-BGHpolyA-表达单元的片段，定向克隆入pcDNA3.1B，即得载体pcDNA3.1AB。将DsRed与EGFP基因插入pcDNA3.1AB，分别构建pcDNA-DsRed、pcDNA-EGFP和pcDNA-DsRed-EGFP。质粒转染COS-7细胞瞬时表达，用荧光显微镜进行检测。结果双价质粒pcDNA-DsRed-EGFP能同时表达红色和绿色荧光蛋白基因，两基因表达强度无显著差异，且双价与单价质粒相比荧光蛋白表达强度相当。