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非人灵长类在遗传和生理特性上与人类具有很高的相似性,是研究人类疾病、发育、和临床前治疗等方面最为理想、有时甚至是唯一的实验动物。通过遗传修饰的方法获得灵长类动物模型对探讨疾病的致病机理和治疗有重大的意义。但是,基因修饰技术活动灵长类动物模型存在较大的难度。锌指核酸酶(Zinc-finger nucleases,ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effectors nucleases,TALENs)和规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromicrepeats,CRISPR)等系统为基因定点修饰开辟了新的途径。我们与国内相关单位合作,选定3 个目的基因[调节干细胞的干性以及参与调节动物性别决定(nuclear receptorsubfamily 0 group B member 1,Nr0b1)； 帮助调节新陈代谢(peroxisomeproliferator-activated receptor gamma,Ppar- γ)； 与健康的免疫功能相关(recombination activating gene 1,Rag1)],将Cas9 mRNA 及3 个基因特定的向导RNA 混合物注射到食蟹猴1 细胞期胚胎的卵胞质中,成功获得了2 个基因(Ppar-γ和Rag1)同时被敲除的食蟹猴[15]。同时,选用X-连锁的、突变及缺失可导致雷特综合征(Rett syndrome,RTT)的甲基CpG 结合蛋白2(methyl CpG binding protein 2,MECP2)基因[9],构建MECP2 靶向TALEN 质粒并注射到猕猴及食蟹猴的1 细胞期胚胎。最终获得了高效打靶、并符合RTT 表型特征的猕猴及食蟹猴模型材料。研究结果证明,CRISPR/Cas9 和TALENs 技术可以用于灵长类基因修饰动物模型的构建,为高效建立人类疾病的动物模型提供了重要参考。