登革病毒Ⅱ型感染人真皮微血管内皮细胞后通透性改变的机制研究

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目的:了解登革病毒Ⅱ型(Dengue virus Type 2,DENV-2)感染原代人真皮微血管内皮细胞(Primary Human dermal micro-vascular endothelial cells,p HDMECs)引起细胞通透性改变的机制。方法:用103 TCID50的DENV-2感染p HDMECs;于4,8,12,24及48 h Real time-PCR、免疫荧光法及流式细胞术检测DENV-2 NS1部分序列部分序列;Transwell法检测细胞通透性;Real time-PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-6和IL-8的变化;流式细胞术检测24,48和72 h细胞凋亡。结果:DENV-2感染的p HDMECs病毒NS1部分序列基因相对表达上调,但未检测到病毒NS1部分序列蛋白;DENV-2感染的p HDMECs通透性在24和48 h显著升高;p HDMECs被感染72 h后凋亡也无明显变化;IL-6和IL-8 mRNA分别在8 h和24 h相对表达上调(IL-6:2.49±0.5倍,P<0.05;IL-8:6.82±1.69倍P<0.05);对照组和感染组分泌的IL-6于8h分别为869.6±50.7 pg/ml、1248.8±86.9 pg/ml(P<0.05);IL-8于48h分别为967.6±156.6 pg/ml、1331.0±86.3 pg/ml(P<0.05)。结论:DENV-2能感染p HDMECs;p HDMECs被DENV-2感染后,细胞的通透性增加与凋亡无关,与促炎性细胞因子IL-6和IL-8明显上调关系密切。
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