【摘 要】
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目的:探索let-7b miRNA和miR-27a是否在炎症细胞因子IL-6作用下,参与调控核转录因子NF-κB及抗凋亡蛋白p-FOXO1,进而促进细胞炎性恶变的馈路关系.方法:将let-7b拟似物及抑制剂转入人肝癌HepG2细胞,并与IL-6(20ng/ml)共孵育24h和48h,观察细胞增殖克隆情况;采用蛋白免疫印迹检测Lin28B表达水平,并检测分子通路p-STAT3,p-Akt(ser47
【机 构】
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浙江大学药学院 药理毒理与生化药学研究所 杭州 310058 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治
【出 处】
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浙江省毒理学会第一届学术年会暨食品药品与人类健康论坛
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目的:探索let-7b miRNA和miR-27a是否在炎症细胞因子IL-6作用下,参与调控核转录因子NF-κB及抗凋亡蛋白p-FOXO1,进而促进细胞炎性恶变的馈路关系.
方法:将let-7b拟似物及抑制剂转入人肝癌HepG2细胞,并与IL-6(20ng/ml)共孵育24h和48h,观察细胞增殖克隆情况;采用蛋白免疫印迹检测Lin28B表达水平,并检测分子通路p-STAT3,p-Akt(ser473),FOXO1,p-FOXO1,NF-κB(P50,P65)表达情况.结果:软琼脂糖增殖克隆实验结果显示let-7b拟似物可抑制克隆形成，let-7b抑制剂则促进克隆形成，IL-6具有促克隆形成作用。蛋白免疫印迹系统阐明了IL-6可激活p-STAT3,p-Akt(ser473)，并促使NF-κB上调。一方面，在IL-6/NF-KB联合作用下Lin28B上调，抑制let-7b,let-7b下调则进一步促进IL-6/NF-κB表达;另一方面，FOXO1受miR-27a调控，其中miR-27a受IL-6/NF-κB调控，NF-κB的入核促进p-FOXO1出核。以上结果提示存在信号馈路IL-6/STAT3/NF-κB/Lin28B/let-7及IL-6/NF-κB/miR-27a/FOXO1，这两条信号馈路可能协同参与调控肝细胞炎性恶变。
结论:MicroRNA let-7b及miR-27a参与调控白IL-6介导的HepG2细胞NF-κB/FOXO1通路。
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