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活细胞通过各种信号转导通路对动态化学信号做出响应[1]。为了研究细胞信号转导，由于药物诱导的细胞表面受体脱敏[2]，对照试验往往是在其他细胞内进行的，又由于细胞间的异质性[3]，可能会产生一些含糊的结果。这里，我们研发了一款基于微流控水力门控的药物脉冲发生器，其溶液交换时间约17毫秒，能够毫秒刺激单个贴壁细胞。我们制作了内含十字通道的PDMS-玻璃杂合芯片，并利用可控的负压脉冲将NIH-3T3细胞分步送入微通道，每步最短约100微米。细胞贴壁后，100毫秒20微摩的ATP脉冲（间隔50秒）流经细胞，每个脉冲产生的钙峰峰高维持在一个相对稳定的值，表明P2Y受体脱敏程度最小化以及快速恢复敏感。于是，我们对同一个细胞进行不同浓度、不同作用时间的ATP脉冲刺激，分析钙信号并发现ATP在低浓度时诱导钙释放的量是时间依赖的。