【摘 要】
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与核基质相连的,以早幼粒白血病突变蛋白(the promyeocytic leukemia protein,PML)为核心分子组装而成的多蛋白复合物PML核体(PML nuclear bodies,PML NBs),能作为DNA损
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850
【出 处】
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第七届中国核学会“三核”论坛暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议
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与核基质相连的,以早幼粒白血病突变蛋白(the promyeocytic leukemia protein,PML)为核心分子组装而成的多蛋白复合物PML核体(PML nuclear bodies,PML NBs),能作为DNA损伤的动态感受器,通过其组份的组装和去组装协同调控DNA损伤修复,细胞周期阻滞和细胞凋亡等信号途径,是维持基因组稳定性的关键多蛋白复合物之一.为进一步揭示PML的功能及调控机制,通过CoIP-MS鉴定获得辐射致DNA损伤反应中新的PML结合蛋白NPM1.MCF-7细胞中,NPM1蛋白在辐照后表达增高,其定位出现从核仁到核浆的扩散.免疫荧光共聚焦显微镜证实照射后NPM1和PML存在共定位,GST-pull down发现,体外PML和NPM1存在直接相互作用,NPM1与PML相互作用的区段位于NPM1N端1-117aa,而PML与NPM1相互作用的区段位于PML的1-360aa的RBCC结构和394-433 aa.NPM1通过促进PML的泛素-蛋白酶体途径降解负调控PML表达.NPM1敲低的MCF-7细胞受照后PML表达升高,caspase-3激活和细胞凋亡增加；同时DSBs损伤修复延缓,G2/M阻滞降低.敲低PML能够抑制敲低NPM1诱发的细胞凋亡,同时caspase-3激活也受到抑制.上述试验揭示了γ射线诱发的DNA损伤反应中NPM1调控PML参与细胞凋亡调控的新信号途径.
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