鳄鱼骨中含有大量的胶原蛋白,鳄骨胶原蛋白水解可以得到一系列具有特殊生理功能的多肽。为全面了解酶解工艺(蛋白酶种类、酶解时间、酶解温度)对鳄鱼骨胶原活性肽抑制血管紧张素酶(ACE)功能特性的影响,采用单因素试验优化水解条件,制备高生理活性的骨胶原蛋白多肽。结果表明,制备的最佳酶解工艺条件为:采用碱性蛋白酶作为水解酶,在维持自然状态的p H(大约为7.6)下,水解时间4 h,酶量为1.0%,温度55℃。采用Sephadex G-25层析分离,得到具有更强抑制ACE活性的鳄鱼骨胶原蛋白多肽水解物,我们命名为M3,它对ACE的半抑制浓度(IC50)为1.74 mg/m L。建立酶动力学模型,判断M3对ACE的抑制模式。发现随着M3浓度的增大,Km值和Vm值均变小,其抑制机理表现为反竞争型抑制。模拟胃肠道消化生理条件下用消化酶胃蛋白酶和胰凝乳蛋白酶进行消化处理,考察M3的稳定性,结果发现消化酶处理后M3对ACE抑制活性的IC50值影响不大,虽然略有降低或上升,但均不明显。说明M3对消化酶的处理是稳定的。综上,从鳄鱼骨中经酶法制备所得具有抑制ACE活性的胶原蛋白肽M3,其作用机理为反竞争型抑制。它具有较高的稳定性,能抵抗体内消化酶的处理而活性几乎保持不变。本研究将为开发新型口服抗高血压的ACE抑制剂奠定了理论基础。